Полиакриламид гели электрофорезы нәрсә ул?

Полиакриламид гели электрофорезы

Гель электрофорезы - биологик дисциплиналардагы лабораторияләрдә төп техника, ДНК, РНК һәм аксымнар кебек макромолекулаларны аерырга рөхсәт итә. Төрле аеру чаралары һәм механизмнары бу молекулаларның субсекцияләрен физик характеристикаларын кулланып нәтиҗәлерәк аерырга мөмкинлек бирә. Белгечләр өчен, аеруча полиакриламид гели электрофорезы (PAGE) еш сайлау ысулы.

1

БЕТ - макромолекулаларны аеручы техника, мәсәлән, протеиннар, аларның электрофоретик хәрәкәтенә нигезләнеп, ягъни аналитикларның каршы корылма электродына таба хәрәкәт итү сәләте. БЕТтә бу корылма, зурлык (молекуляр авырлык) һәм молекуланың формасы белән билгеләнә. Аналитиклар полиакриламид гелендә барлыкка килгән күзәнәкләр аша хәрәкәт итәләр. ДНК һәм РНКдан аермалы буларак, протеиннар аминокислоталар буенча зарарлы булалар, бу аларның эшләвенә тәэсир итә ала. Аминокислота кыллары шулай ук ​​аларның зурлыгына тәэсир итә торган икенчел структуралар формалаштырырга мөмкин, нәтиҗәдә алар күзәнәкләр аша ничек хәрәкәт итә алалар. Шуңа күрә кайвакыт протеиннарны электрофорезга кадәр сызып куярга кирәк булыр, зурлыкны төгәл бәяләү таләп ителсә.

SDS БЕТ

Натрий-додецил сульфат полиакриламид гели электрофорезы - 5 - 250 kDa массаларның протеин молекулаларын аеру өчен кулланылган ысул. Белгечләр молекуляр авырлык нигезендә генә аерыла. Натрий додецил сульфаты, анион сирфактант, протеин үрнәкләренең эчке корылмаларын маскалаучы һәм масса нисбәтенә охшаш корылма бирүче гель әзерләүдә кушыла. Гади сүзләр белән әйткәндә, ул протеиннарны тәнкыйтьли һәм тискәре корылма бирә.

2

Туган бит

Туган бит - протеиннарны аеру өчен денатур булмаган гельләрне куллана торган техника. SDS PAGEдан аермалы буларак, гель әзерләүдә бернинди денатурат агент өстәлми. Нәтиҗәдә, протеиннарның аерылуы протеиннарның корылмасы һәм зурлыгы нигезендә була. Бу техникада протеиннарның конформациясе, катлау һәм аминокислота чылбырлары аерылуга бәйле факторлар. Белгечләр бу процесста зарарланмыйлар, һәм аерылганнан соң торгызылырга мөмкин.

3

Полиакриламид гели электрофорезы (БЕТ) ничек эшли?

PAGE-ның төп принцибы - аналитикларны электр токы ярдәмендә полиакриламид гел күзәнәкләре аша үткәрү. Бу максатка ирешү өчен, акриламид - бисакриламид катнашмасы аммиак персульфаты (APS) кушылып полимерлаштырылган (полиакриламид). Тетраметилетиленедиамин (TEMED) белән катализацияләнгән реакция, аналитиклар хәрәкәт итә ала торган күзәнәкләр кебек челтәр формалаштыра (2 нче рәсем). Гельгә кертелгән гомуми акриламидның процентлары никадәр югары булса, күзәнәк күләме кечерәк була, шуңа күрә үтеп китә алырлык аксымнар кечерәк. Акриламидның бисакриламид белән чагыштырмасы күзәнәк күләменә дә тәэсир итәчәк, ләкин бу еш даими саклана. Кечкенә күзәнәк зурлыклары шулай ук ​​кечкенә протеиннарның гель аша хәрәкәт итү тизлеген киметәләр, аларның резолюциясен яхшырталар һәм ток кулланылганда буферга тиз кереп китүләрен булдырмыйлар.

3-1

Полиакриламид гели электрофорезы өчен җиһазлар

Гель электрофорез күзәнәге (танк / палата)
Полиакриламид гели электрофорезы өчен гель танкы агароза гел танкыннан аерылып тора. Агароза гел танкы горизонталь, PAGE танкы вертикаль. Вертикаль электрофорез күзәнәге (танк / камера) белән ике пыяла тәлинкә арасына нечкә гель (гадәттә 1,0 мм яки 1,5 мм) куялар һәм гельнең аскы өлеше бер буферда буферда, өске буферда су астында калалар. бүтән палатада. Ток кулланылганда, аз күләмле буфер гель аша өске палатадан аскы палатага күчә. Монтажның туры торышына гарантия бирү өчен көчле кыскычлар белән җиһаз тиз гель белән эшне җиңеләйтә, хәтта суыту белән, аерым полосаларга китерә.

4

Пекин Люйи Биотехнологияләр ООО (Люйи Биотехнология) полиакриламид гели электрофорез күзәнәкләрен (танклар / палаталар) җитештерә. DYCZ-20C һәм DYCZ-20G модельләре - ДНК эзләү анализы өчен вертикаль электрофорез күзәнәкләре (танклар / палаталар). Кайбер вертикаль электрофорез күзәнәкләре (танклар / палаталар) блотлау системасына туры килә, DYCZ-24DN, DYCZ-25D һәм DYCZ-25E моделе Көнбатыш Blotting системасы DYCZ-40D, DYCZ-40G һәм DYCZ-40F, белок молекуласын гельдән мембранага күчерү өчен кулланыла. SDS-PAGE электрофорезыннан соң, Western Blotting - протеин катнашмасында билгеле бер протеинны табу ысулы. Сез бу шартлау системаларын эксперимент таләпләренә туры китереп сайлый аласыз.

6

Электрофорез электр белән тәэмин итү
Гельне эшләтеп җибәрү өчен электр белән тәэмин итү өчен сезгә электрофорез электр белән тәэмин итү кирәк булачак. Люйи биотехнологиясендә без барлык кушымталар өчен электрофорез энергиясен тәэмин итәбез. Yгары тотрыклы көчәнеш һәм ток белән DYY-12 һәм DYY-12C моделе югары көчәнеш таләпләрен электрофорезга канәгатьләндерә ала. Аның стенд, вакыт, VH һәм этаплап куллану функциясе бар. Алар IEF һәм ДНК эзләү электрофорезы өчен идеаль. Гомуми протеин һәм ДНК электрофорезы куллану өчен бездә DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 һәм башкалар бар, алар электрофорез күзәнәкләре (танклар / палаталар) белән кайнар сату көче. Болар урта һәм түбән көчәнешле электрофорез кушымталары өчен кулланылырга мөмкин, мәсәлән, мәктәп лабораториясе, больница лабораториясе һ.б. Электр белән тәэмин итү өчен күбрәк модельләр, зинһар, безнең сайтка керегез.

7

Liuyi бренды Кытайда 50 елдан артык тарихка ия ​​һәм компания бөтен дөнья буенча тотрыклы һәм югары сыйфатлы продуктлар белән тәэмин итә ала. Еллар үсеше аркасында ул сезнең сайлауга лаек!

Безнең турында күбрәк мәгълүмат алу өчен зинһар, электрон почта аша безнең белән элемтәгә керегез[электрон почта сакланган] or [электрон почта сакланган].

Полиакриламид гели электрофорезы өчен сылтамалар?
1. Карен Стюард полиакриламид гели электрофорезы, аның ничек эшләве, техник вариантлары һәм кулланылышы


Пост вакыты: 23-2022 май